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顯微鏡的基本使用方法

日期:2018/12/23 15:53:59 點擊次數 1162 發布單位:天義生物谷  錄入:李清

顯微鏡的使用

利用自然光源鏡檢時,最好用朝北的光源,不宜采用直射陽光;利用人工光源時,宜用日光燈的光源。

鏡檢時身體要正對實習臺,采取端正的姿態,兩眼自然張開,左眼觀察標本,右眼觀察記錄及繪圖,同時左手調節焦距,使物象清晰并移動標本視野。右手記錄、繪圖。

鏡檢時載物臺不可傾斜,因為當在五套載物臺傾斜時,液體或油易流出,既損壞了標本,又污染載物臺,也影響檢查結果。

鏡檢時應將標本按一定方向移動視野,直至整個標本觀察完畢,以便不漏檢,不重復。

顯微鏡的重光為對光,接物鏡的轉換及光線的調節。觀察寄生蟲標本時,光線調節甚為重要。因為所觀察的標本如蟲卵、包囊等,均為自然光狀態的物體,有大有小,色澤有深有淺,有的無色透明,而低倍、高倍接物鏡轉換較多,故須隨著鏡檢時對不同標本和要求,需要隨時調節焦距和光線,這樣才能使觀察的物象清晰。在一般情況下,染色標本光線宜強,無色或未染色標本光線宜弱;低倍鏡觀察光線宜弱,高倍鏡觀察光線宜強。

1. 對光:

(1)將低倍鏡轉至鏡筒下方與鏡筒成一直線。

(2)撥動反光鏡,調節至視野最亮無陰影。反光鏡有平、凹兩面,光源強時用平面,較暗時用凹面,需要強光時,將聚光器提高,光圈放大;需要弱光時,將聚光器降低,或光圈適當縮小。

(3)將待觀察的標本置載物臺上,轉動粗調節器使鏡筒下降至接物鏡接近標本。于轉動粗調節器的同時,須俯身在鏡旁仔細觀察接物鏡與標本之間的距離。

(4)左眼于接目鏡觀察,同時左手轉動粗調節,使鏡筒徐徐上升以調節焦距,使視野內的物象看到上時即停,再調微調節器,至標本清晰為止。

2. 接物鏡的使用及光線的調節:

顯微鏡一般具有三個接物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定于接物鏡轉換盤孔中。觀察標本時,先使用低倍接物鏡,此時,視野較大,標本較易查出,但放大倍數較小(一般放大100倍),較小的物體不易觀察其結構。高倍接物鏡放大的倍數較大(一般放大400倍),能觀察微小的物體或結構。

寄生蟲的蠕蟲卵,微絲蚴,原蟲的滋養體及包囊,昆蟲的幼蟲,均使用低、高倍鏡。組織細胞內的原蟲,則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察,如在低倍鏡下不能準確鑒定所見的物體或其內部構造時,則轉高倍鏡觀察。使用油鏡觀察,一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進行鏡檢觀察。

3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別:

(1)標明放大倍數10×,40×,100×,或10/0.25,40/0.65,100/1.25。

(2)低倍鏡最短,高倍鏡較長,油鏡最長。

(3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大,高倍鏡較大,油鏡最小。

(4)油鏡頭上常刻有黑色環圈,或“油”字。

4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法:

(1)光線對好后,移動推進器尋找需要觀察的標本。

(2)如標本的體積較大,不能清楚查見其構造因而不能確認時,則將標本移至視野中央,再旋轉高倍接物鏡于鏡筒下方。

(3)旋轉微調節器至物象清晰為止。

(4)調節聚光器及光圈,使視野內的物象達到最清晰的程度。

5. 油鏡的使用方法:

(1)原理:使用油鏡觀察時,需加香柏油,因為油鏡需要進入鏡頭的光線多,但油鏡的透氣孔最小,這樣進入的光線就少,物體不易看清楚。同時又因自玻片透過的光線,由于介質(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片:n=1.52,空氣:n=1.0)不同而發生了折射散光,因此射入鏡頭的光線就更少,物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質如香柏油,加于標本與玻片之間,使光線不通過空氣,這樣射入鏡頭的光線就較多,物象就看得清楚。

(2)油鏡的使用:

a.將光線調至最強程度(聚光器提高,光圈全部開放)。

b.轉動粗調節器使鏡筒上升,滴香柏油1小滴(不要過多,不要涂開)于接物鏡正下方標本上。

c.轉動接物鏡轉換盤,使油鏡頭于鏡筒下方。

d.俯身鏡旁側面在肉眼的觀察下,轉動粗調節器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內,輕輕接觸玻片為止。

e.慢慢轉動粗調節器,使油鏡頭徐徐上升至見到標本的物象為止。

f.轉動微調節器,使視野物象達到最清晰的程度。

g.左手徐徐移動推進器,并轉動微調節器以觀察標本。

h.標本觀察完畢后,轉動粗調節器將鏡筒升起,取下標本玻片。立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。

6. 注意事項:

(1)使用顯微鏡之前,應熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法,特別應掌握識別三種接物鏡之特征。

(2)寄生蟲學實習中所觀察的標本,大多數為無色和顏色較淺,因此必須注意光線的調節。

(3)新鮮標本觀察時,須加蓋玻片,以免標本因蒸發而干燥變形或污染侵蝕接物鏡,同時可使標本表面勻平,光線得以集中,有利于觀察。

(三) 顯微鏡的保養

圖3 加用蓋玻片后,標本表面勻平,光線得以集中,便于檢查示意圖

1.顯微鏡在從木箱中取出或裝箱時,右手緊握鏡臂,左手穩托鏡座,輕輕取出。不要只用一只手提取,以防顯微鏡墜落,然后輕輕放在實習臺上或裝 入木箱內。

2.顯微鏡放到實習臺上時,先放鏡座的一端,再將鏡座全部放穩,切不可使鏡座全面同時與臺面接觸,這樣震動過大,透鏡和微調節器的裝置易損壞。

3.顯微鏡須經常保持清潔,勿使油污和灰塵附著。如透鏡部分不潔時,用擦鏡紙輕擦,如有油污,先將擦鏡紙蘸少許二甲苯拭去。

4.顯微鏡不能在陽光下暴曬和使用。

5.接目鏡和接物鏡不要隨便抽出和卸下必須抽取接目鏡時,須將鏡筒上口凈用布遮蓋,避免灰塵落入鏡筒內。更換接物鏡時,卸下后應倒置在清潔的臺面下,并隨即裝入木箱的置放接物鏡的管內。

6.顯微鏡用完后,取下標本片,經聚光器降下,再將物鏡轉成“八”字形,轉動粗調節器使鏡筒下降,以免接物鏡與聚光器相碰。

7.顯微鏡應放在干燥的地方,以防生霉。

二、體視顯微鏡的使用

體視顯微鏡能獲得立體感覺,其原理是由于通過兩個接目鏡對物體從不同的方向在人眼的網膜上形成的象而產生的。本顯微鏡具有傾斜成45°的雙筒,通過雙筒可以觀察到寬廣視野中正立的具有立體感的物象。其中右側接目鏡筒上有視度調節圈的位置,如觀察者雙眼視度具有差異,可以先調節顯微鏡使左眼成像清晰,然后旋轉右側視度調節圈至右眼成像清晰。雙筒可以在一定角度內相對地轉動以適應工作者兩眼間距離。本顯微鏡的工作距離為100mm,在方形鏡身兩側有手輪可旋轉,利用它的轉動可在不變更工作距離情況下更換顯微鏡放大倍數。顯微鏡總放大倍數的讀數,在使用25×接目鏡時,以右側數盤上數字為準,而使用6.3×接目鏡時,則以左側數盤上的數字為準。

三、其它儀器器材的使用與保養

除顯微鏡、體視顯微鏡以外,寄生蟲學實習課用的器材、儀器尚有許多,在此我們不一一贅述,每次實習課輔導教師將向我們介紹,這里僅將這些儀器、器材分類別略作一些使用原理的介紹。

(一)玻璃儀器、器材:使用時輕拿輕放,防止破碎,用畢應清洗干凈、涼干、烘干以防生霉。

(二)金屬儀器、器材:勿接觸或少接觸酸性、堿性物品,用畢應洗刷、擦凈、涼干、烘干以防腐蝕生銹

 
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