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放线菌的形态观察方法及注意事项

日期:2018/9/6 19:30:56 点击?#38382;?nbsp;1017 发布单位:天义生物谷  录入:李清

放线菌是由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。菌丝体分为两部分,即潜入培养基中的营养菌丝(或称基内菌丝)和生长在培养基表面的气生菌丝。有些气生菌丝分化成各种孢子丝,?#20107;?#26059;形、波浪形或?#31181;?#29366;等。孢子常呈圆形、椭圆形或杆形。气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据。


想要了解放线菌的形态首先要准备实验材料和用具?#21512;?#40644;链霉菌(streptomycs micuoflavus)?#27542;?406的培养平皿,棘孢小单孢菌(Micromonospora echinospora)的玻璃纸培养平皿。 0.1%美蓝染色液、石炭酸复红染色液; 盖玻片、载玻片、镊子、接种环、显微镜、涂布器、玻璃纸、打孔器。


操作步骤


(一)观察自然生长状态的放线菌


用镊?#26377;?#24515;取出用插片法培养的5406菌培养皿中的一张盖玻片,将其背面附着的菌丝体擦净。然后将长有菌的一面向上放在洁净的载玻片上,用低倍镜、高倍镜观察。?#39029;?类菌丝及其分生孢子,并绘图。注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。


(二)水封片观察


取一滴美蓝染色液置于载玻片中央,将用搭片法培养棘孢小单孢菌培养皿中的盖玻片取出,并将有菌面朝下,放在载玻片上,浸在染色液中,制成水封片,用高倍镜观察其单个分生孢子及其基内菌丝,并绘图。


(三)玻璃纸法的镜检观察


1.直接玻璃纸观察   分别用5406和棘孢小单孢菌的玻璃纸制片观察。制片?#20445;?#20110;载玻片上放一小滴蒸馏水,将含菌玻璃纸片小心剪下一小块,移至载玻片上,并使有菌面向上。在玻璃?#25509;?#36733;玻片间不能有气泡,以免影响观察。将制片于显微镜下观察,先用低倍镜观察菌的立体生长?#32431;觶?#20877;用高倍镜仔细观察。注意区分5406菌的基内菌丝、气生菌丝和弯曲状或螺旋状的孢子丝。观察棘孢小单孢菌时注意把视野调暗,其基内菌丝纤细发亮,其单个分生孢子发暗,直接生长在基内菌丝长出的小梗上。绘图。


2.印片染色法观察   用镊子取洁净载玻片并微微加热,然后用这微热载玻片盖在长有5406或棘孢小单孢菌的平皿上,轻轻压一下,注意将载玻片垂直放下和取出,以防载玻片水平移动而破坏放线菌的自然形态。反转有印痕的载玻片微微加热固定.用石炭酸复红染色l min,水洗,晾干。用油镜观察。绘图。注意比较两种菌的形态特征有何不同。


注意事项


1.培养放线菌中要注意,放线菌的生长速度?#19979;?#22521;养期较长,在操作中应特别注意无菌操作,严防杂菌污染。


2.玻璃纸法培养接种时注意玻璃?#25509;?#24179;板琼脂培养基间不宜有气泡,以免影响其表面放线菌的生长,


3.不同观察方法中?#32454;?#25353;要求进行,注意菌体的上下位置。

 
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